Diferencia clave: citometría de flujo vs FACS

En el contexto de la teoría celular, las células son la unidad básica estructural y funcional de todos los organismos vivos. La clasificación celular es una metodología que se utiliza para separar diferentes células de acuerdo con las características fisiológicas y morfológicas. Pueden ser de características intracelulares o extracelulares. La interacción del ADN, el ARN y las proteínas se consideran propiedades interactivas intracelulares, mientras que la forma, el tamaño y las diferentes proteínas de superficie se consideran propiedades extracelulares. En la ciencia moderna, las metodologías de clasificación celular han ayudado a la investigación diferente en estudios biológicos y también en el establecimiento de nuevos principios a través de la investigación en medicina. La clasificación celular se lleva a cabo en varias metodologías que incluyen primitivas con menos equipos y metodologías tecnológicas avanzadas con el uso de maquinaria sofisticada. La citometría de flujo, la clasificación de células activadas fluorescentes (FACS), la selección de células magnéticas y la clasificación de células individuales son las principales metodologías utilizadas. La citometría de flujo y FACS se desarrollan para diferenciar las células de acuerdo con sus propiedades ópticas. FACS es un tipo especializado de citometría de flujo. La citometría de flujo es una metodología que se utiliza durante el análisis de una población heterogénea de células de acuerdo con diferentes moléculas de superficie celular, tamaño y volumen que permite la investigación de células individuales. FACS es un proceso mediante el cual una mezcla de muestra de células se clasifica de acuerdo con sus características de dispersión de luz y fluorescencia en dos o más recipientes. Esta es la diferencia clave entre citometría de flujo y FACS.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia clave 2. Qué es la citometría de flujo 3. Qué es FACS 4. Similitudes entre la citometría de flujo y FACS 5. Comparación lado a lado - Citometría de flujo vs FACS en forma de tabla 6. Resumen

¿Qué es la citometría de flujo?

La citometría de flujo es un método que se utiliza para examinar y determinar la expresión de moléculas intracelulares y la superficie celular y para definir y caracterizar distintos tipos de células. También se usa para determinar el volumen celular y el tamaño celular y para evaluar la pureza de las subpoblaciones que están aisladas. Esto permite la evaluación multiparamétrica de celdas individuales aproximadamente al mismo tiempo. La citometría de flujo se usa para medir la intensidad de la fluorescencia que se produce debido a los anticuerpos marcados con fluorescencia que ayudan a identificar proteínas o ligandos que se unen a las células asociadas.

En general, la citometría de flujo incluye tres subsistemas principalmente. Son la fluídica, la electrónica y la óptica. En citometría de flujo, hay cinco componentes principales disponibles que se utilizan en la clasificación celular. Son, una celda de flujo (una corriente de líquido que se utiliza para transportarlos y alinear las celdas para el proceso de detección óptica), un sistema de medición (puede ser de diferentes sistemas, incluyendo lámparas de mercurio y xenón, refrigerado por agua de alta potencia o láser de baja potencia refrigerado por aire o láser de diodo), un ADC; Sistema convertidor analógico a digital, sistema de amplificación y una computadora para análisis. La adquisición es el proceso mediante el cual se recopilan los datos de las muestras mediante citómetro de flujo. Este proceso está mediado por una computadora que está conectada con el citómetro de flujo. El software presente en la computadora analiza la información alimentada a la computadora desde el citómetro de flujo. El software también tiene la capacidad de ajustar los parámetros del experimento que controla el citómetro de flujo.

¿Qué es el FACS?

En el contexto de la citometría de flujo, la clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS) es un método que se utiliza para diferenciar y clasificar una muestra de una mezcla de células biológicas. Las celdas están separadas de dos o más contenedores. El método de clasificación se basa en las características físicas de la célula, que incluye la dispersión de la luz y las características de fluorescencia de la célula. Esta es una técnica científica importante, que puede utilizarse para obtener resultados cuantitativos y cualitativos confiables de las señales de fluorescencia que se emiten desde cada célula. Durante FACS, inicialmente, la mezcla de células obtenida previamente; una suspensión se dirige al centro de una corriente estrecha de líquido que fluye rápidamente. El flujo de líquido está diseñado para separar las células en la suspensión en función del diámetro de cada célula. Se aplica un mecanismo de vibración a la corriente de suspensión que da como resultado la formación de gotas individuales.

El sistema está calibrado para crear una sola gota con una celda. Justo antes de la formación de gotas, la suspensión de flujo se mueve a lo largo de un aparato de medición de fluorescencia que detecta la característica de fluorescencia de cada célula. En el punto de formación de las gotas, se coloca un anillo de carga eléctrica que induce una carga al anillo antes de la medición de la intensidad de fluorescencia. Una vez que las gotas se forman a partir de la corriente de suspensión, queda atrapada una carga dentro de las gotas que luego entra en un sistema de desviación electrostática. Según la carga, el sistema desvía las gotas a diferentes contenedores. El método de aplicación de la carga varía según los diferentes sistemas utilizados en FACS. El equipo utilizado en FACS se conoce como un clasificador celular activado por fluorescencia.

¿Cuál es la similitud entre citometría de flujo y FACS?


  • La citometría de flujo y FACS se desarrollan para diferenciar las células de acuerdo con sus propiedades ópticas.

¿Cuál es la diferencia entre citometría de flujo y FACS?

Resumen - Citometría de flujo vs FACS

La célula es la unidad básica estructural y funcional de todos los organismos vivos. La clasificación celular es el proceso por el cual las células se aíslan y se diferencian en diferentes categorías en función de sus propiedades intracelulares y extracelulares. La citometría de flujo y FACS son dos metodologías importantes en la clasificación celular. Ambos procesos se desarrollan para diferenciar las células según sus propiedades ópticas. La citometría de flujo es una metodología que se utiliza durante el análisis de una población heterogénea de células de acuerdo con diferentes moléculas de superficie celular, tamaño y volumen que permite la investigación de células individuales. FACS es un proceso mediante el cual una mezcla de muestra de células se clasifica de acuerdo con sus características de dispersión de luz y fluorescencia en dos o más recipientes. Esta es la diferencia entre citometría de flujo y FACS.

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Referencia:

  1. Citometría de flujo (FCM) / FACS | Clasificación celular activada por fluorescencia (FACS). Consultado el 22 de septiembre de 2017. Disponible aquí Ibrahim, Sherrif F. y Ger van den Engh. "Citometría de flujo y clasificación de células." SpringerLink, Springer, Berlín, Heidelberg, 1 de enero de 1970.. Consultado el 22 de septiembre de 2017. Disponible aquí

Imagen de cortesía:


  1. 'Cytometer' By Kierano - Own work, (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia 'Fluorescence Assisted Cell Sorting (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Desarrollo de un sistema de modelo in vitro para estudiar la interacción de Equus caballus IgE con su receptor FcεRI de alta afinidad (tesis doctoral), The University of Sheffield, (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia